Протимікробна дія бішофіту вивчалася в експериментах in vitro. Стандартизований розсіл бішофіту досліджувався як компонент рідкої і щільного поживного середовища з концентрацією від 0,01% до 50%. В експериментах були задіяні еталонні штами патогенної мікрофлори (Staphilococcus Aureus, Streptococcus Mutans, Candida albicans). Агар і бульйон Хоттингера з pH 7,4 використовували в якості поживного середовища для Staphilococcus і Streptococcus, агар і бульйон Сабуро з pH 6,8 використовували в якості поживного середовища для Candida albicans. 48-годинні суспензії (вирощені при температурі 37 ° і 28 ° відповідно) агарових культур мікроорганізмів з концентрацією 102, 104 і 106 мб (мікробних тіл) / мл по стандарту мутності ГКІ. ) Для бактерій. Камеру Горячева використовували для розрахунку дріжджових клітин Candida albicans. При вивченні бактеріальних властивостей препарату в щільних і рідких поживних середовищах гранична концентрація мікроорганізмів склала 106 мб / мл середовища, що, згідно з наказом МОЗ № 535 від 22 квітня, є епідеміологічно важливим значенням. , 1985 про уніфікацію мікробіологічних (біологічних) методів дослідження, застосовуваних в клініко-діагностичних лабораторіях лікувально-профілактичних установ. Більш низькі концентрації мікроорганізмів (102 і 104 мб / мл середовища) використовували для оцінки бактеріостатичної дії агентів. Критерієм ефективності агента було зростання колоній: дуже рідкісний зростання - зростання одиночних колоній (до 10); убогий зростання - від 10 до 25 колоній; помірне зростання - понад 50 колоній; інтенсивне зростання - незліченні колонії. Полімінерол (Болгарія), стандартизований розчин поморського природного розсолу (концентрат морської води, що містить хлорид магнію) був обраний в якості порівнянного агента. Зростання колоній або їх відсутність свідчили про ефективність антимікробної дії бішофіту і іншого агента.
Результати досліджень (таблиці 7,8) оброблені статистично, використані параметричні методи дослідження з використанням комп'ютерної програми Excel 5.0.
Встановлено, що розсіл бішофіту з концентрацією 50% повністю пригнічує ріст штамів Staphilococcus Aureus, Streptococcus Mutans і Candida albicans, розсіл бішофіту з концентрацією 20-30% помірно пригнічує Staphilococcus Aureus з концентрацією 5-30%. він пригнічує Candida albicans як в рідких, так і в твердих поживних середовищах. Полімінерол в концентраціях 5-50% не чинив антимікробної дії.
Дослідження показують, що бішофіт пригнічує ріст мікроорганізмів при дозі посіву 106 мб / мл середовища тільки з концентрацією 30%, що доводить той факт, що бактерицидний ефект настає тільки при високій концентрації бішофіту. При посівної дозі 102 і 104 м.б. / Мл бішофіт надавав бактеріостатичну дію на стафілококи і стрептококи з концентрацією 20% і на Candida з концентрацією 10%.
Таблиця 7. Вплив бішофіту на зростання опортуністичних мікроорганізмів в рідких поживних середовищах.
Концентрація в середовищі,% | Зростання мікроорганізмів при посівної дозі, м.б. / Мл середовища | ||||||||
Стафілокок Авреус | Стрептокок Мутанів | Candida albicans | |||||||
10 6 | 10 4 | 10 2 | 10 6 | 10 6 | 10 2 | 10 6 | 10 4 | 10 2 | |
контроль | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
30 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
20 | + | 0 | 0 | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 |
10 | + | + | 0 | + | + | + | + | 0 | 0 |
5 | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
Номенклатура: + - зростання в бульйоні
0 - відсутність зростання в бульйоні
Таблиця 8. Вплив бішофіту на зростання опортуністичних мікроорганізмів в щільних поживних середовищах
Концентрація в середовищі,% | Зростання мікроорганізмів при посівної дозі, м.б. / страва | ||||||||
Стафілокок Авреус | Стрептокок Мутанів | Candida albicans | |||||||
10 6 | 10 4 | 10 2 | 10 6 | 10 4 | 10 2 | 10 6 | 10 4 | 10 2 | |
контроль | +++ | +++ | ++ | +++ | ++ | ++ | +++ | +++ | ++ |
30 | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
20 | + | + | 0 | + | + | 0 | + | 0 | 0 |
10 | +++ | +++ | + | ++ | ++ | 0 | + | + | 0 |
5 | +++ | +++ | ++ | +++ | +++ | ++ | +++ | ++ | + |
Номенклатура: x - кількість колонієутворюючих одиниць (КУО) мікроорганізмів на чашку.
Критерії оцінювання:
+ - відсутність зростання
+ - зростання від 10 до 50 КУО / блюдо
++ - зростання більше 50 КУО / блюдо
+++ - зростання більше 100 КУО / блюдо
Бішофіт in vitro надавав бактеріостатичну дію на Streptococcus pyogenes і Clostridium perfringens в розведенні 1/32, на Pseodomonas aeruginosa і Proteus vulgaris в розведенні 1/16, на E. сoli в розведенні 1/8, на Bacillus subtilis і Streptococcus aureus в розведенні S ( повірений А. М. та ін., 1991). Бішофіт надавав бактерицидну дію на Streptococcus pyogenes в розведенні 1/8, на Pseodomonas aeruginosa і Proteus vulgaris і кишкову паличку тільки в розведенні не більше ніж в два рази. Слід відзначити високу активність мінералу по відношенню до анаеробної інфекції Clostridium perfringens.
Мінімальна концентрація бішофіту, який надає бактеріостатичний ефект in vitro в анаеробних умовах, склала 0,315-1,25%. Бішофіт не чинив бактерицидного дії на Bacillus subtilis і Streptococcus aureus. У ряді випадків можна було засіяти окремі колонії цих мікроорганізмів в концентрованому розсолі мінералу. Дослідження трьох штамів дріжджів: двох штамів Saccharomyce cerevisiae (гаплоїдний і диплоїдний) і Candida albicans (Повірений А. М. та ін., 1991) довело фунгіцидну дію бішофіту при розведенні його розсолу на 50%. Бішофіт в концентрації 25% чинив сильний мікостатіческое дію, а в концентрації від 4% до 12,5% знижував швидкість проліферації і життєздатність досліджуваних штамів дріжджів.