Iмунотропний ефект

На 45 білих звичайних мишах масою 18-20 г вивчали вплив бішофіту на фагоцитарну активність полінуклеарів крові. Щодня протягом 6 днів мишам робили підшкірні ін'єкції стандартизованого розчину бішофіту (10%). Фагоцитарну активність нейтрофілів оцінювали на 3-е і 6-е добу по фагоцитарної індексу і НСТ-тесту, певним за методикою Исин Ж. М. та Сулейбінов Б. М. (1987).

Для вивчення иммунотропного ефекту 20 нелінеальним білим щурам масою 150-170 г в стегнову область підшкірно вводили дозу 1 мл / кг стандартизованого розчину бішофіту (у вигляді стерильного апірогенної 10% розчину на водній основі). уколи щодня протягом 6 днів поспіль. Імунологічні показники визначали через 3 дні після припинення інфузії розчину бішофіту. До контрольної групи увійшли тварини, яким вводили таку ж кількість розчинника. Вивчали периферичну кров і селезінку тварин. Визначалися наступні показники: кількість лімфоцитів в селезінці, процентний вміст основних популяцій лімфоцитів в розеточной реакції з еритроцитами кролика (Т-лімфоцитами) і частинками опсонізовані зімозана (В-лімфоцити) (Сановська І. В.., Фоменко В. Н., 1979) , кількість антітелообразующіх клітин (АФК) в селезінці за допомогою методу місцевого гемолізу (Клемпарская Н. Н., 1969), проліферативна активність лімфоцитів за допомогою фитогемагглютинина. (PHA) ( «Flow Laboratoris») і мітоген Лакон (мл) ( «Flow Laboratores»). Радіометричним методом (Константинова Н. Р., 1985) з урахуванням включення [3H] -метілметідіна в рибонуклеїнової кислоту, зареєстрованого на рідинному сцинтиляційних лічильнику «Mark-III» (Delta Medical), розрахований індекс стимуляції (SI) за формулою:

У сироватці крові тварин концентрацію лізоциму досліджували турбидиметричним методом з використанням комплектів і методик НПП «Реакомплекс».

Результати досліджень оброблялися статистично, достовірність відмінностей оцінювалася за допомогою t-критерію Стьюдента.

Дані, представлені на рис. 5 показують, що розчин бішофіту при введеній дозі в 1,5-1,8 рази збільшував фагоцитарний індекс нейтрофілів (відсоток поглинання мікробними клітинами) більше 3 днів, показник тесту з нітросинім тетразолієм (NBT-тест) максимально збільшилася в 3 рази, що свідчить про посилення мієлопероксидази, вивільненні вільного кисню і завершення стадії фагоцитозу.

Вплив бішофіту на клітинний склад селезінки і їх проліферативну активність показано в таблиці 6. Цих даних достатньо, щоб стверджувати, що мінеральне вплив на клітинний склад селезінки і їх проліферативну активність незначно. Концентрація Т і В-лімфоцитів знаходиться в межах контрольних значень. Під впливом бішофіту проліферативна активність лімфоцитів (в реакції бластной трансформації в ФГА і мітоген лаконос) практично не змінилася, отже, препарат не чинить иммунодепрессивного дії і, ймовірно, не порушує синтез лімфокінів - ІЛ-1 і ІЛ-2.

Стимулююча дія бішофіту в діапазоні концентрацій 10 г / л на фагоцитарну активність моноцитів і нейтрофілів людини (в експериментах in vitro) було продемонстровано в дослідженнях Дзяк Г. В. та ін. (1997). Автори також встановили, що бішофіт підсилює окислювально-відновний метаболізм у досліджуваних стимульованих і нестимульований фагоцитах. Швидше за все, ці зміни можна інтерпретувати, використовуючи результати дослідження, проведеного Park J. et al. (1992) про роль іонів магнію в освіті комплексу НАДФ-оксидаза у зовнішній клітинній мембрані і даних De Valk H. W. et al. (1933) про дефіцит магнію в нейтрофілах хворих на бронхіальну астму.

Рис. 5. Вплив бішофіту на фагоцитарну активність нейтрофілів крові мишей:

А - фагоцитарний індекс PI (кількість нейтрофілів на 100 клітин фагоцитарних бактерій); Б - НСТ-тест (процентний вміст нейтрофілів, що містять гранули діформозана).

Таблиця 6

Вплив стандартизованого розчину бішофіту на клітинний склад спленоцитів, їх функціональну активність, стимуляцію утворення антитіл і концентрацію лізоциму (M ± m)

* - дані вірні з контролю p <0,05 n - кількість тварин у групі

Бішофіт викликав значне збільшення кількості антітелообразующіх клітин в селезінці. Можна припустити, що у інфікованих тварин бішофіт посилює утворення антитіл. Антитіла, які взаємодіють з антигенними детермінантами бактеріальної поверхні, сприяють формуванню мембранного атакуючого комплексу (МАК), що викликає ушкодження бактеріальної клітини (Соколов Є.І., 1998). Беручи до уваги той факт, що комплемент C3b залежить від магнію (Ройт А., 1991), можна припустити, що МАК активніший під дією бішофіту.

Одним з факторів місцевого неспецифічного імунітету є лізоцим - фермент, який розщеплює мураміловую кислоту всередині оболонки грампозитивнихмікроорганізмів аж до лізису мікробних клітин (Соколов Є.І., 1998). Фактично під дією розчину бішофіту концентрація лізоциму в сироватці крові збільшується на 48%, що має велике значення для побудови антимікробної захисту організму.