Противомикробное действие бишофита изучалось в экспериментах in vitro. Стандартизированный рассол бишофита исследовался как компонент жидкой и плотной питательной среды с концентрацией от 0,01% до 50%. В экспериментах были задействованы эталонные штаммы патогенной микрофлоры (Staphilococcus Aureus, Streptococcus Mutans, Candida albicans). Агар и бульон Хоттингера с pH 7,4 использовали в качестве питательной среды для Staphilococcus и Streptococcus, агар и бульон Сабуро с pH 6,8 использовали в качестве питательной среды для Candida albicans. 48-часовые суспензии (выращенные при температуре 37 ° и 28 ° соответственно) агаровых культур микроорганизмов с концентрацией 102, 104 и 106 мб (микробных тел) / мл по стандарту мутности ГКИ. ) для бактерий. Камеру Горячева использовали для расчета дрожжевых клеток Candida albicans. При изучении бактериальных свойств препарата в плотных и жидких питательных средах предельная концентрация микроорганизмов составила 106 мб / мл среды, что, согласно приказу Минздрава № 535 от 22 апреля, является эпидемиологически важным значением. , 1985 об унификации микробиологических (биологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений. Более низкие концентрации микроорганизмов (102 и 104 мб / мл среды) использовали для оценки бактериостатического действия агентов. Критерием эффективности агента был рост колоний: очень редкий рост - рост одиночных колоний (до 10); скудный рост - от 10 до 25 колоний; умеренный рост - более 50 колоний; интенсивный рост - бесчисленные колонии. Полиминерол (Болгария), стандартизированный раствор поморского природного рассола (концентрат морской воды, содержащий хлорид магния) был выбран в качестве сопоставимого агента. Рост колоний или их отсутствие свидетельствовали об эффективности антимикробного действия бишофита и другого агента.
Результаты исследований (таблицы 7,8) обработаны статистически, использованы параметрические методы исследования с использованием компьютерной программы Excel 5.0.
Установлено, что рассол бишофита с концентрацией 50% полностью подавляет рост штаммов Staphilococcus Aureus, Streptococcus Mutans и Candida albicans, рассол бишофита с концентрацией 20-30% умеренно подавляет Staphilococcus Aureus с концентрацией 5-30%. он подавляет Candida albicans как в жидких, так и в твердых питательных средах. Полиминерол в концентрациях 5-50% не оказывал антимикробного действия.
Исследования показывают, что бишофит подавляет рост микроорганизмов при дозе посева 106 мб / мл среды только с концентрацией 30%, что доказывает тот факт, что бактерицидный эффект наступает только при высокой концентрации бишофита. При посевной дозе 102 и 104 м.б. / мл бишофит оказывал бактериостатическое действие на стафилококки и стрептококки с концентрацией 20% и на Candida с концентрацией 10%.
Таблица 7. Влияние бишофита на рост оппортунистических микроорганизмов в жидких питательных средах.
Концентрация в среде, % | Рост микроорганизмов при посевной дозе, м.б. / мл среды | ||||||||
Staphilococcus Aureus | Streptococcus Mutans | Candida albicans | |||||||
10 6 | 10 4 | 10 2 | 10 6 | 10 6 | 10 2 | 10 6 | 10 4 | 10 2 | |
Контроль | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
30 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
20 | + | 0 | 0 | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 |
10 | + | + | 0 | + | + | + | + | 0 | 0 |
5 | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
Номенклатура: + - рост в бульоне
0 - отсутствие роста в бульоне
Таблица 8. Влияние бишофита на рост оппортунистических микроорганизмов в плотных питательных средах
Концентрация в среде, % | Рост микроорганизмов при посевной дозе, м.б. / блюдо | ||||||||
Staphilococcus Aureus | Streptococcus Mutans | Candida albicans | |||||||
10 6 | 10 4 | 10 2 | 10 6 | 10 4 | 10 2 | 10 6 | 10 4 | 10 2 | |
Контроль | +++ | +++ | ++ | +++ | ++ | ++ | +++ | +++ | ++ |
30 | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
20 | + | + | 0 | + | + | 0 | + | 0 | 0 |
10 | +++ | +++ | + | ++ | ++ | 0 | + | + | 0 |
5 | +++ | +++ | ++ | +++ | +++ | ++ | +++ | ++ | + |
Номенклатура: x - количество колониеобразующих единиц (КОЕ) микроорганизмов на чашку.
Критерии оценки:
+ - отсутствие роста
+ - рост от 10 до 50 КОЕ / блюдо
++ - рост более 50 КОЕ / блюдо
+++ - рост более 100 КОЕ / блюдо
Бишофит in vitro оказывал бактериостатическое действие на Streptococcus pyogenes и Clostridium perfringens в разведении 1/32, на Pseodomonas aeruginosa и Proteus vulgaris в разведении 1/16, на E. сoli в разведении 1/8, на Bacillus subtilis и Streptococcus aureus в разведении S (Поверенный А. М. и др., 1991). Бишофит оказывал бактерицидное действие на Streptococcus pyogenes в разведении 1/8, на Pseodomonas aeruginosa и Proteus vulgaris и кишечную палочку только в разведении не более чем в два раза. Следует отметить высокую активность минерала по отношению к анаэробной инфекции Clostridium perfringens.
Минимальная концентрация бишофита, оказывающего бактериостатический эффект in vitro в анаэробных условиях, составила 0,315–1,25%. Бишофит не оказывал бактерицидного действия на Bacillus subtilis и Streptococcus aureus. В ряде случаев можно было засеять отдельные колонии этих микроорганизмов в концентрированном рассоле минерала. Исследование трех штаммов дрожжей: двух штаммов Saccharomyce cerevisiae (гаплоидный и диплоидный) и Candida albicans (Поверенный А. М. и др., 1991) доказало фунгицидное действие бишофита при разбавлении его рассола на 50%. Бишофит в концентрации 25% оказывал сильное микостатическое действие, а в концентрации от 4% до 12,5% снижал скорость пролиферации и жизнеспособность исследуемых штаммов дрожжей.