Иммунотропный эффект

На 45 белых обычных мышах массой 18-20 г изучали влияние бишофита на фагоцитарную активность полинуклеаров крови. Ежедневно в течение 6 дней мышам делали подкожные инъекции стандартизированного раствора бишофита (10%). Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали на 3-е и 6-е сутки по фагоцитарному индексу и НСТ-тесту, определенным по методике Исин Ж. М. и Сулейбинов Б. М. (1987).

Для изучения иммунотропного эффекта 20 нелинеальным белым крысам массой 150-170 г в бедренную область подкожно вводили дозу 1 мл / кг стандартизированного раствора бишофита (в виде стерильного апирогенного 10% раствора на водной основе). уколы ежедневно в течение 6 дней подряд. Иммунологические показатели определяли через 3 дня после прекращения инфузии раствора бишофита. В контрольную группу вошли животные, которым вводили такое же количество растворителя. Изучали периферическую кровь и селезенку животных. Определялись следующие показатели: количество лимфоцитов в селезенке, процентное содержание основных популяций лимфоцитов в розеточной реакции с эритроцитами кролика (Т-лимфоцитами) и частицами опсонизированного зимозана (В-лимфоциты) (Сановский И. В. ., Фоменко В. Н., 1979), количество антителообразующих клеток (АФК) в селезенке с помощью метода местного гемолиза (Клемпарская Н. Н., 1969), пролиферативная активность лимфоцитов с помощью фитогемагглютинина. (PHA) («Flow Laboratoris») и митоген лакон (мл) («Flow Laboratores»). Радиометрическим методом (Константинова Н. Р., 1985) с учетом включения [3H] -метилметидина в рибонуклеиновую кислоту, зарегистрированного на жидкостном сцинтилляционном счетчике «Mark-III» (Delta Medical), рассчитан индекс стимуляции (SI) по формуле: 

В сыворотке крови животных концентрацию лизоцима исследовали турбидиметрическим методом с использованием комплектов и методик НПП «Реакомплекс».

Результаты исследований обрабатывались статистически, достоверность различий оценивалась с помощью t-критерия Стьюдента.

Данные, представленные на рис. 5 показывают, что раствор бишофита при введенной дозе в 1,5-1,8 раза увеличивал фагоцитарный индекс нейтрофилов (процент поглощения микробными клетками) более 3 дней, показатель теста с нитросиним тетразолом (NBT-тест ) максимально увеличилась в 3 раза, что свидетельствует об усилении миелопероксидазы, высвобождении свободного кислорода и завершении стадии фагоцитоза.

Влияние бишофита на клеточный состав селезенки и их пролиферативную активность показано в таблице 6. Этих данных достаточно, чтобы утверждать, что минеральное влияние на клеточный состав селезенки и их пролиферативную активность незначительно. Концентрация Т- и В-лимфоцитов находится в пределах контрольных значений. Под воздействием бишофита пролиферативная активность лимфоцитов (в реакции бластной трансформации в ФГА и митоген лаконос) практически не изменилась, следовательно, препарат не оказывает иммунодепрессивного действия и, вероятно, не нарушает синтез лимфокинов - ИЛ-1 и ИЛ-2.

Стимулирующее действие бишофита в диапазоне концентраций 10 г / л на фагоцитарную активность моноцитов и нейтрофилов человека (в экспериментах in vitro) было продемонстрировано в исследованиях Дзяк Г. В. и др. (1997). Авторы также установили, что бишофит усиливает окислительно-восстановительный метаболизм в исследуемых стимулированных и нестимулированных фагоцитах. Скорее всего, эти изменения можно интерпретировать, используя результаты исследования, проведенного Park J. et al. (1992) о роли ионов магния в образовании комплекса НАДФ-оксидаза во внешней клеточной мембране и данных De Valk H. W. et al. (1933) о дефиците магния в нейтрофилах больных бронхиальной астмой.

Рис. 5. Влияние бишофита на фагоцитарную активность нейтрофилов крови мышей:

А - фагоцитарный индекс PI (количество нейтрофилов на 100 клеток фагоцитарных бактерий); Б - НСТ-тест (процентное содержание нейтрофилов, содержащих гранулы диформозана).

Таблица 6

Влияние стандартизированного раствора бишофита на клеточный состав спленоцитов, их функциональную активность, стимуляцию образования антител и концентрацию лизоцима (M ± m)

* - данные верны по контролю p <0,05 n - количество животных в группе

Бишофит вызвал значительное увеличение количества антителообразующих клеток в селезенке. Можно предположить, что у инфицированных животных бишофит усиливает образование антител. Антитела, взаимодействующие с антигенными детерминантами бактериальной поверхности, способствуют формированию мембранного атакующего комплекса (МАК), вызывающего повреждение бактериальной клетки (Соколов Е. И., 1998). Принимая во внимание тот факт, что комплемент C3b зависит от магния (Ройт А., 1991), можно предположить, что МАК более активен под действием бишофита.

Одним из факторов местного неспецифического иммунитета является лизоцим - фермент, расщепляющий мурамиловую кислоту внутри оболочки грамположительных микроорганизмов вплоть до лизиса микробных клеток (Соколов Е. И., 1998). Фактически под действием раствора бишофита концентрация лизоцима в сыворотке крови увеличивается на 48%, что имеет большое значение для построения антимикробной защиты организма.